روش های تشخیص آدرس مونی

ویروس مونکیپکس (MPXV)، آبله و واکسنیا همگی متعلق به نسل ارتوپوکس ویروس است. ویروس مونکی پوکس عمدتا توسط دُدها، اولیه ها و دیگه حیوانات وحشی به انسان منتقل میشه که باعث يک بيماري ويروسي نادر ميشه در اول سپتامبر ۱۹۷۰، اولین موارد انسانی MPXV در بیمارستان بسانکوسو در کنگو شناسایی شد. ویروس مونکی پوکس عمدتا توسط دُدها، اولیه ها و دیگه حیوانات وحشی به انسان منتقل میشه که باعث يک بيماري ويروسي نادر ميشه علائم کلینیک آبل میمون شبیه آبله هستند، اما علائم لطیف تر هستند. مانکیپکس بیشتر در مناطق دوردست آفریقای مرکزی و غربی اتفاق افتاد که نزدیک جنگل های استوایی است. با سازگاری با انسان ها، MPXV به تدریج به دو طبقه تغییر یافت: شعبه آفریقای مرکزی (Congo Basin) و شعبه غرب آفریقا. در میان آنها، شاخه ی باسین کنگو باکره و انتقال قوی تری دارد.

معرفی به MPXV

ویروس مونکی پوکس یک ویروس پوشش دو برابره دی ان ای است که بستگی به دی ان ای میزبان و تغییرات آر ان ای است، و ميتونه در سايتوپلاسم ميزبان تغيير بده شبیه ویروس های یک نسل MPXV بسیار احتمال می تواند ویروس بالغ درون سلولی (IMV) را تغییر دهد. و ویروس مخفی سلولی (EEV) در سایتوپلاسم میزبان. IMV ها يک ساختار فيزيکي قوي دارند که انتقال بين ميزبانها رو راه اندازي ميکنه در حالی که EEV های شکننده تر پوشیده می شوند و اجازه ایمنی توسط میزبان محدود می شوند. بنابراین EEVs برای انتقال ویروس به سلول مناسب تر هستند. MPXV می تواند موثری مانوسیت های اولیه انسان را آلوده کند و واکنش های سلول T محلی رو با جلوگیری فعال سازی CD4 و CD8 T را از بین ببرد، به همين خاطر جلوگيري از ايمني سيستمي و نظارت ايمني

تشخیص کلینیکی ویروس میمون پوکس.

بهترین نمونه های تشخیصی برای آبله میمون از زخم های پوست می آید: مایع از وسیکال و پوست ها و خرده های خشک. نمونه های زیشن باید در لوله های خشک و استریل ( مانند VTM) ذخیره شوند و سرد نگه دارند. تشخیص کلینیکی آبله میمون باید اختلالات جوش دیگری مانند آبله مرغ، سرخ، عفونت پوست باکتری رو در نظر بگیره ، سفليس ، و آلرژي مربوط به مواد مخدر در مرحله اول بیماری ممکن است تنها ویژگی کلینیکی باشد که آبله میمون را از آبله مرغ یا کوچک تشخیص می دهد آبله

نمونه برداری از میکروسکوپ الکترون

زیر میکروسکوپ الکترون، MPXV شکل آجر در سايتوپلاسم بود با بدن های جانبی و هسته مرکزي حدود 200-300 nm طول داشت از آنجایی که مشخصات OPV از لحاظ طبیعی قابل تشخیص نیست این روش نمیتونه تشخیص رو تایید کنه اما ميتونه پيشنهاد بده

دو شناسایی ژن

2.1. در زمان واقعی فلورسنسی پی.آر

آشکارسازی کاربردی MPXV DNA روی نمونه های بالینی و فرهنگ های سلول آلوده شده MPXV، با PCR یا روش حقیقی PCR. تشخيص توصيه ميشه که در مرکز زيست امنيت 3 اجرا بشه روش PCR زمانی واقعی باید برای تشخیص ژن خارجی پروتئین (B6R)، ژن پلیمرز DNA استفاده شود، منطقه نگهداری شده ای E9L، RNA پلیمراس با اعتبار به زیر واحد ۱۸، rpo18 و F3L ژن.

2.2. چند ضلعی طول محدودیت) RFLP (

PCR یا طول محدودیت پلیومرم (RELP) می تواند برای تشخیص MPXV DNA هم استفاده شود، اما RFLP زمان است و به فرهنگ ویروس نیاز داره RFLP از محصولات PCR همچنین نیازمند هضم به دنبال الکتروفورesis ژل است، که ممکن است بهترین روش های کلینیک نباشد که سرعت، حساسیت و مشخصیت حیاتی باشد.

2.3. تکنولوژی دنباله نسل بعدی) NGS (

توالی کامل با روش NGS استاندارد طلا برای تفاوت MPXV و دیگر ارتوپوکس (OP) باقی مانده است. وی) شخصیت سازی، اما تکنولوژی پردازش داده های توالی بسیار هزینه است و به پایین ترتیب نیاز به قدرت محاسباتی عظیم دارد. بنابراین، NGS ممکن است یک روش مناسب در کشورهای محدود با منابع در ساحل آفریقا نباشد. پی سی آر در زمان واقعی هنوز روش ترجیح میده برای تشخیص معمول MPXV در تکنولوژی آزمایش ژنتیکی اما بايد با تکنولوژي توالي ژنوم در سايت اضافه بشه مانند آکسفورد نانوپور

حمله ايمنو

حمله ای ایمنی ویروس مونکیپکس عمدتاً شامل انزیم ایمنوسوربنت (ELISA) برای تشخیص پادتن های IgG/IgM و آشکارسازی آنتیژن ویروسی تحلیل ایمنوکومیکی از آنتین های MPXV می تواند آن را از ویروس هرپس تشخیص دهد. پادتن های ضد ويروسی و پاسخ های سلول های تی در حالی که آغاز بیماری شدند با ویروس میمون پوکس IgM و IgG در سرم حدود پنج روز بعد از شروع جوش و بعد از هشت روز شناسایی شده عفونت احتمال MPXV باید تشخیص داده شود اگر پادتن IgM و IgG در سرم افرادی که بدون واکسن نشده با ها تاریخ عجول و بیماری شدید. يک آزمايش مثبت IgM ELISA نشون ميده که اخيرا در معرض MPXV قرار داره در حالی که یک آزمایش مثبت IgG نشان می دهد که فرد قبلاً در معرض MPXV بوسیله واکسن یا عفونت طبیعی قرار گرفته است. حضور IgM و IgG در یک نمونه نشون می دهد که واکسن قبلی یا در معرض افرادی که به طور طبیعی با MPXV آلوده شده اند. با این حال ویروس ارتوپوکس از لحاظ سرو شناسی واکنشی هستند و آنتيژن و آنتي بادي ها تاييد نميکنند اما ممکنه براي آزمايش سر شناسي در مناطق MPXV امکان پذير باشه

ر:

[1] سارا کیسی، کریستین پوگ، الکساندر تیخونوف، و اول. مبنای پروتنومیک پاسخ آنتی بادی به عفونت ویروس مونکیپکس در سایتومالگس مکاکی و مقایسه. به واکسن آبل کوچک انسان. Plos 1، 2010، 5(12): e15547.

(به انگلیسی:) ویروس مونکیpox در نیجریه: زیست عفونت، اپیدمیولوژی، و تکنولوژی [J. ویروس ها، 2020، 12(11):1257.